人腫瘤壞死因子α(h TNF-α)elisa試劑盒
試劑盒簡介:
腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor,TNF)是一種具有多種生物活性的細(xì)胞因子。人TNF-α基因編碼前體蛋白,其信號肽將前體蛋白固定在細(xì)胞膜上,成為具有活性的跨膜干擾素(TNF),分子質(zhì)量為26×103,經(jīng)酶切去除信號肽生成分泌型TNF-α,分子質(zhì)量為17×103。TNF-α細(xì)胞來源廣泛,包括各種**細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、表皮細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、星形細(xì)胞、成骨細(xì)胞等。
TNF-α具有廣泛的生物學(xué)活性,如:參與炎性反應(yīng)和**應(yīng)答,抗腫瘤,參與內(nèi)**性休克等病理過程,引起惡病質(zhì)等。其具有雙重作用,,一方面在機(jī)體**調(diào)節(jié),機(jī)體生理功能和抗感染等方面發(fā)揮重要作用,另一方面若持續(xù)釋放或產(chǎn)生過多則會引起發(fā)熱!、休克、惡病質(zhì)等,同時TNF-α可進(jìn)一步誘導(dǎo)IL-6、IL-8、IL-10等細(xì)胞因子的產(chǎn)生,這些促炎性細(xì)胞因子參與體內(nèi)急性反應(yīng)、發(fā)熱反應(yīng)、引起趨化肽釋放等,還可使內(nèi)皮細(xì)胞活化而導(dǎo)致血管通透性增加。
本實驗采用雙抗體夾心法。抗人TNF-α單抗包被于酶標(biāo)板上,標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的TNF-α會與單抗結(jié)合,游離的成分被洗去。加入生物素化的抗人TNF-α抗體和辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素,生物素與親和素特異性結(jié)合;抗人TNF-α抗體與結(jié)合在單抗上的人TNF-α結(jié)合而形成**復(fù)合物,游離的成分被洗去加入顯色劑,若反應(yīng)孔中有TNF-α,辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑顯藍(lán)色,加終止液變黃。在450 nm處測OD值,TNF-α濃度與OD450值之間呈正比,可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中人TNF-α濃度。
本試劑盒用于體外定量檢測人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液或組織勻漿上清液中人TNF-α濃度,供科研使用。
試劑盒內(nèi)容物:
產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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1a標(biāo)準(zhǔn)品
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2支(凍干)
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1b標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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1瓶
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2a濃縮生物素化抗體
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1支
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2b生物素化抗體稀釋液
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1瓶
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3a濃縮酶結(jié)合物
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1支
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3b酶結(jié)合物稀釋液
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1瓶
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4濃縮洗滌液20×
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1瓶
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顯色液
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1瓶
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終止液
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1瓶
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抗體包被板條
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8*12
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封板膠紙
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3張
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說明書
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1份
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保存條件:
4℃保存,6個月有效。
注意事項:
1. 短期內(nèi)使用可將試劑盒保存在2-8℃,如長時間請于-20℃保存。
2. 濃縮生物素化抗體(2a),濃縮酶結(jié)合物(3a)裝量極少,運輸中可能會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請用手甩幾下或離心處理,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
4. 不建議重復(fù)使用標(biāo)準(zhǔn)品。
5. 充分混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤其重要,*好使用微量振蕩器,也可在反應(yīng)過程中手工混勻。
6. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙復(fù)孔或三復(fù)孔。
7. 為了您的**和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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